人参皂甙RB2对培养人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

        人参皂甙Rb2是从人参根和茎叶中提取的二醇组皂甙，具有多种生物学效应。以往研究表明，西洋参根人参二醇组皂甙（主要含有Rb1、Rb2、Re和Rd.）和人参茎叶总皂甙（含Rb2、Rc、Rd、Re、Rf和 Rg2）具有抑制RPE细胞增殖的作用，我们进一步证实了人参皂甙单体Rb1对RPE的增殖抑制作用。

        增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）是引起视力障碍甚至失明的严重眼病，玻璃体手术虽可有效治疗PVR，但术后仍有一些病人复发，最终导致视力丧失。随着对PVR病因学 的了解及药理学的研究进展，探讨PVR的药物治疗 成为国内外眼科工作者的研究热点。视网膜色素上皮细胞是发生PVR时重要的因素之一，在病理情况下可移行至玻璃体内并与许多细胞因子共同参与下在玻璃体散布、增生、合成胶原及其它细胞基质，并形成具有收缩力的膜。本实验通过细胞计数法和MTT比色法探讨Rb2对RPE细胞增生的影响。结果发现Rb2在一定浓度范围内对培养RPE细胞增生具有抑制作用，在一定时间和剂量范围内存在时间依赖和剂量依赖关系。我们还发现贴壁生长良好的RPE细胞在给药后3h即可见部分细胞脱落，而贴附是贴附型细胞生长增殖的条件之一，通常细胞表面有由细胞分泌的糖蛋白膜，即细胞外衣，它对细胞运动尤其是贴附于支持物生长有重要作用。细胞外衣的性质与细胞物质交换、酸碱失衡及膜电位等有关，改变细胞外衣的性质可使细胞由支持物上脱落下来。研究表明RPE细胞中游离钙的浓度调节细胞吞噬功能状态、细胞增殖及细胞与基底膜的粘附力；同时钙离子还是细胞收缩、吞噬、物质转运与代谢及酶活性调节的基础调控者。大量实验证实Rb2具有钙通道阻滞作用，可抑制细胞外钙内流降低细胞内钙浓度，由此推测Rb2可能改变膜电位和细胞外衣的性质引起细胞粘附力、增殖力下降。此外，还通过降低细胞内钙浓度干扰细胞功能、细胞内酶活性和物质代谢。由于正常活细胞线粒体内活性脱氢酶可将MTT还原为紫色的甲，且细胞的存活数与其产生甲的A值之间存在线性关系。MTT比色法发现给药组细胞甲产生量少于对照组，A值明显低于对照组，进一步证实Rb2可干扰细胞代谢。总之，Rb2可能通过阻滞钙通道降低细胞内钙浓度、干扰细胞代谢、改变细胞外衣的性质而抑制RPE细胞增殖。Rb2作用与人参二醇组皂甙相似，且在较低浓度即表现明显的抑制作用。有关Rb2能否抑制DNA、胶原合成及对PVR动物的治疗作用有待进一步探讨，Rb2有望对PVR的防治产生一定的作用。

来源：哈尔滨医科大学学报2002年10月第36卷第5期 

作者：明月 于澎 庞利民 拱中华